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化學(xué)發(fā)光分析儀的分析方式該如何理解?

更新時(shí)間:2022-06-20 點(diǎn)擊次數:969
  化學(xué)發(fā)光分析儀又稱(chēng)化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA ) ,是用化學(xué)發(fā)光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標記的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)有吖啶酯類(lèi)化合物——acridinium ester (AE) ,是有效的發(fā)光標記物 , 其通過(guò)起動(dòng)發(fā)光試劑作用而發(fā)光, 強烈的直接發(fā)光在一秒鐘內完成,為快速的閃爍發(fā)光。吖啶酯作為標記物用于免疫分析, 其化學(xué)反應簡(jiǎn)單、快速、無(wú)須催化劑;檢測小分子抗原采用競爭法 ,大分子抗原則采用夾心法 , 非特異性結合少, 本底低;與大分子的結合不會(huì )減小所產(chǎn)生的光量, 從而增加靈敏度。
 
  從標記免疫分析角度, 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析( chemi luminescent enzyme immuno assay, CLEIA ) , 應屬酶免疫分析, 只是酶反應的底物是發(fā)光劑,操作步驟與酶免分析*相同: 以酶標記生物活性物質(zhì)(如酶標記的抗原或抗體) 進(jìn)行免疫反應,免疫反應復合物上的酶再作用于發(fā)光底物,在信號試劑作用下發(fā)光, 用發(fā)光信號測定儀進(jìn)行發(fā)光測定。目前常用的標記酶為辣根過(guò)氧化物酶(HRP) 和堿性磷酸酶(ALP) ,它們有各自的發(fā)光底物。
 
  化學(xué)發(fā)光分析儀系統是利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)經(jīng)催化劑的催化和氧化劑的氧化, 形成一個(gè)激發(fā)態(tài)的中間體, 當這種激發(fā)態(tài)中間體回到穩定的基態(tài)時(shí), 同時(shí)發(fā)射出光子(hM) , 利用發(fā)光信號測量?jì)x器測量光量子產(chǎn)額。免疫反應系統是將發(fā)光物質(zhì)(在反應劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體) 直接標記在抗原(化學(xué)發(fā)光免疫分析) 或抗體(免疫化學(xué)發(fā)光分析) 上, 或酶作用于發(fā)光底物。
 
  化學(xué)發(fā)光分析儀中核心探測器件為光電倍增管(PMT),由單光子檢測并傳輸至放大器,并加高壓電流放大,放大器將模擬電流轉化為數字電流,數字電流將發(fā)光信號由R232數據線(xiàn)傳輸給電腦并加以計算,得出臨床結果。

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